細(xì)胞和組織PCR 試劑盒Plus（免核酸提取）
貨號：Nu-C01
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒可用于動物組織或細(xì)胞DNA 的克隆、重組細(xì)胞株鑒定、DNA 病毒鑒定、STR 鑒定等。TC-DNA-Lysis 采用配方，10 分鐘內(nèi)裂解各種細(xì)胞和組織。使用過程中無需大體積樣本、無需反復(fù)離心，從而獲得高質(zhì)量的DNA 模板。經(jīng)過驗證，該試劑盒可以對單個細(xì)胞或10 個病毒粒子進(jìn)行檢測。
本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等域。
試劑盒組成
保存條件
-20oC 保存。
使用將TC-DNA-Lysis 室溫充分混勻，使用可4℃保存。
2×TaqMix(With Dye)溶解后需置于冰上，避免反復(fù)凍融。
需要準(zhǔn)備
金屬恒溫浴、離心機、PCR 儀
使用方法
一、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
（1）組織液包括組織研磨液、細(xì)胞懸液等。取10 μL組織液置于離心管中。
（2）加入20 μLTC-DNA-Lysis。
（3）充分混勻。
（4）置于55℃作用5 分鐘，然后95℃作用5min。溶液即為DNA 模板。
2. 組織塊的處理
（1）用眼科剪剪取1-2mm 的組織塊，并將組織塊剪成肉泥狀。
（2）加入20 μL TC-DNA-Lysis。
（3）充分混勻。
（4）置于55℃作用5 分鐘，然后95℃作用5min。
（5）10,000 轉(zhuǎn)離心60 取上清。上清即為DNA 模板。
3. 在DNase free 的離心管中配制PCR 反應(yīng)體系
4. 按照以下方法設(shè)定PCR 反應(yīng)
注意事項
一、試劑盒使用注意事項
（1）所有試劑應(yīng)按照適合溫度儲存。請勿反復(fù)凍融。
（2）使用后均需要對操作區(qū)進(jìn)行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均需使用商品化的無酶耗材。
（3）TC-DNA-Lysis 采用配方，若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬于正常現(xiàn)象。
（4）TC-DNA-Lysis 頻繁使用，可在4℃保存。不使用可放-20℃保存。
二、樣本注意事項
（1）細(xì)胞在含/不含血清的環(huán)境中均可直接使用試劑盒。
（2）擴增2kb 以內(nèi)片段，細(xì)胞樣品濃度不超過1000 個細(xì)胞。如若擴增片段超過2kb，可適當(dāng)提高細(xì)胞濃度。
（3）不同組織使用不同的眼科剪和眼科鑷進(jìn)行處理，防止交叉污染導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。
三、試劑盒使用過程中注意事項
（1）PCR 過程中推薦使用陰性對照和陽性對照。
（2）整個過程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中，防止形成環(huán)境污染。
（3）2×Master TaqMix(With Dye)已包含染料，可在反應(yīng)結(jié)束后直接進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。
（4）PCR 產(chǎn)物3’末端含有A，可直接進(jìn)行TA 克隆。
四、試劑盒使用后注意事項
（1）TC-DNA-Lysis 處理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 個月。避免反復(fù)凍融，防止基因組斷裂。
（2）PCR 反應(yīng)完成后，嚴(yán)禁在實驗區(qū)開蓋。應(yīng)在污染區(qū)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，防止氣溶膠污染。
（3）為防止試劑盒污染，請勿將不同批號試劑盒混用。
檢測實例
常見問題解析
上海市楊浦區(qū)國康路100號2層
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